Е.Е. Волков¹, А.П. Голощапов¹, Р.Н. Мустафин², С.Э. Ностаева¹

¹ Общество с ограниченной ответственностью «Медицинский центр ХуанДи», Москва, Россия; ² Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Башкирский государственный медицинский университет», г. Уфа, Россия

STUDY OF ALLELIC VARIANTS OF THE VDR AND PAI GENES IN PATIENTS WITH ASEPTIC NECROSIS OF THE FEMORAL HEAD

1. E. Volkov¹, A. P. Goloshchapov¹, R. N. Mustafin², S. E. Nostaeva¹

¹ Limited Liability Company «HuangDi Medical Center», Moscow, Russia; ² Federal State Budgetary Educational Institution of Higher Education «Bashkir State Medical University», Ufa, Russia

1. Yevgeny Ye. Volkov, M.D., Ph.D., Professor, Medical center HuangDi, LLC, Moscow, Russian Federation; Email: evolkov@femurhead.ru
2. Andrei P. Goloshchapov, Ph.D. of Biological Sciences, Medical center HuangDi, LLC, Moscow, Russian Federation; Email: apg1960@yandex.ru
3. Rustam N. Mustafin — Ph.D. of Biological Sciences, Associate Professor Bashkir State Medical University, Ufa, Russian Federation; Email: ruji79@mail.ru
4. Svetlana E. Nostaeva, Medical Center HuangDi LLC, Moscow, Russian Federation; Email: snostaeva@femurhead.ru

ANNOTATION

 Objective. To assess the informativeness of the carriage of allelic variants of genes that determine the sensitivity of organs and tissues to calcitriol (VDR), as well as those involved in hereditary thrombophilia and hypofibrinolysis (PAI-1), as molecular genetic markers of the development of aseptic necrosis of the femoral head (ANFH). Materials and methods. A clinical and laboratory study of 300 patients with ANFH of Russian nationality living in the European part of Russia was carried out. A comparative analysis of the frequency distribution of alleles and genotypes of the rs11568820 and rs1544410 polymorphisms of the VDR gene, as well as the rs1799889 of the PAI-1 gene in patients with ANFH was undertaken. Results. In patients with ANFH, there was a significant increase in the frequencies of the G/G genotype (P=3.0E-9) and the G allele (P=0.05) of the rs11568820 VDR polymorphism (P=2.10E-08) relative to the control. The frequency of the A/A genotype of the rs1544410 VDR locus in individuals with ANFH exceeds the control values (P =0.05). Patients with this pathology, carriage of the 5G/5G genotype of the rs1799889 PAI-1 polymorphism is more common than in controls (P=0.05). Discussion. It was found that an carriages of the G/G A-3731G (Cdx2) genotype VDR get increased risk of developing ANFH by 2.1 times; in carriers of the G allele, the risk of ANFH is increased by 2.3 times. In carriers of genotype A/A +283 A>G (BsmI) of the VDR gene, the risk of developing ANFH is increased by 2.4 times. The analysis obtained data  showed that the carriage of the 5G allele of the polymorphic locus PAI-1 -675 4G>5G (rs1799889) in patients with ANFH is detected 1.4 times more often than an individuals from the population cohort. The risk of developing pathology is increase by 2.0 times at carriers of the 5G/5G genotype of this polymorphic locus. Conclusion. Carriers of genotypes G/G rs11568820 VDR (allele G), A/A rs1544410 VDR and 5G/5G (allele 5G) at the polymorphic locus rs1799889 PAI-1 have an increased risk of developing ANFH. This allows the use of these molecular genetic markers to identify individuals at increased risk of developing ANFH during early diagnosis.

Key words: Aseptic necrosis, femoral head, allelic variant, VDR, PAI

АННОТАЦИЯ

Цель. Оценить информативность носительства аллельных вариантов генов, определяющих чувствительность тканей к кальцитриолу (VDR) и причастных к наследственной тромбофилии и гипофибринолизу (PAI-1), в качестве молекулярно-генетических маркеров развития асептического некроза головки бедренной кости (АНГБК). Материалы и методы. Проведено клинико-лабораторное исследование 300 пациентов с АНГБК русской национальности проживающих в Европейской части России. Проведен сравнительный анализ распределения частот аллелей и генотипов полиморфизмов rs11568820 и rs1544410 гена VDR, а также rs1799889 гена PAI-1 у пациентов с АНГБК. Результаты. У пациентов с АНГБК установлено достоверное увеличение частот генотипа G/G (P=3,0E-9) и аллеля G (P=0,05) полиморфизма rs11568820 VDR (P=2,10E-08) относительно контроля. Частота генотипа A/A локуса rs1544410 VDR у лиц с АНГБК превышает контрольные значения (P=0,05). У пациентов с данной патологией носительство генотипа 5G/5G полиморфизма rs1799889 PAI-1 встречается чаще, чем в контроле (P=0,05). Обсуждение. Установлено, что у носителей генотипа G/G A-3731G (Cdx2) гена VDR возрастает в 2,1 раза риск развития АНГБК; у носителей аллеля G риск АНГБК повышен в 2,3 раза. У носителей генотипа A/A +283 A>G (BsmI) гена VDR риск развития АНГБК увеличен в 2,4 раза.

Анализ полученных данных показал, что носительство аллеля 5G полиморфного локуса PAI-1 -675 4G>5G (rs1799889) у больных АНГБК выявляется в 1,4 раза чаще, чем у лиц из популяционной выборки. Риск развития  патологии повышен в 2 раза при носительстве генотипа 5G/5G данного полиморфного локуса. Заключение. У носителей генотипов G/G rs11568820 VDR (аллеля G), A/A rs1544410 VDR и 5G/5G (аллеля 5G) в полиморфном локусе rs1799889 PAI-1 повышен риск развития АНГБК. Это позволяет использовать данные молекулярно-генетические маркеры для выявления лиц с повышенным риском развития АНГБК при проведении ранней диагностики.

Ключевые слова: Асептический некроз, головка бедренной кости, аллельный вариант, VDR, PAI

ВВЕДЕНИЕ

АНГБК  – тяжёлое дегенеративно-дистрофическое заболевание кости вследствие нарушения структуры костной ткани, микроциркуляции и жировой дистрофии костного мозга [1–3]. Указанные факторы влияют на стрессовое ремоделирование кости. В зависимости от этиологии АНГБК подразделяют на первичный (идиопатический) и вторичный. Вторичный АНГБК диагностируется в случаях, когда прямое нарушение микроциркуляции кости, или костного мозга связано с идентифицируемой причиной, такой как травматические повреждения, приём стероидов или бисфосфонатов, избыточное потребление алкоголя, серповидноклеточная анемия, аутоиммунные заболевания, химиотерапия или злокачественные новообразования [4–6]. Первичные или идиопатические проявления АНГБК диагностируются в ситуациях, когда причины развития патологии изучены не полностью. В медицинской литературе как потенциальные причины развития идиопатических форм АНГБК описаны генетически детерминированная чувствительность органов и тканей к кальцитриолу, а также наследственная тромбофилия и гипофибринолиз [7–9]. Кальцитриол – физиологически активный конечный метаболит витамина D: образующегося в коже под действием ультрафиолета (холекальциферол) и поступающего с пищей (эргокальциферол). Минеральный обмен организма зависит не только от содержания кальцитриола, но и чувствительности к нему органов-мишеней [10].  Экспрессируемый геном локуса рецептора витамина D (VDR) внутриклеточный рецептор кальцитриола на финальном этапе D-витаминного обмена определяет чувствительность органов и тканей к кальцитриолу [11]. Поскольку АНГБК является мультифакториальным заболеванием, аллельные варианты гена VDR могут выступать в качестве фактора риска [12–14]. В патогенезе асептического некроза также описаны генные мутации белков системы коагуляции и фибринолиза. Одним из основных  компонентов тромболитической плазминоген-плазминовой системы фибринолиза является ингибитор тканевого активатора плазминогена тип 1 (PAI-1) [15]. В ряде работ было показано, что гомозиготный вариант 4G/4G гена ингибитора активатора плазминогена -675 5G>4G (rs1799889) PAI-1 связан с повышенным риском асептического некроза головки бедренной кости [16–18].

Исходя из вышеизложенного, изучение полиморфизмов генов, определяющих чувствительность органов и тканей к кальцитриолу, а также причастных к наследственной тромбофилии и гипофибринолизу как молекулярно-генетических маркеров развития АНГБК представляется актуальным. Цель данной работы состояла в оценке информативности использования аллельных вариантов генов, определяющих чувствительность органов и тканей к кальцитриолу (VDR), а также причастных к наследственной тромбофилии и гипофибринолизу (PAI-1), в качестве молекулярно-генетических маркеров развития АНГБК.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Проведен сравнительный анализ частот встречаемости значимых аллельных вариантов A-3731G (Cdx2) и +283 G>A (BsmI) гена рецептора витамина D VDR и -675 5G>4G (rs1799889) гена ингибитора активатора плазминогена PAI-1 у пациентов с верифицированным диагнозом АНГБК (основная группа) по сравнению с общепопуляционным контролем, включающим практически здоровых лиц русской национальности обоих полов,  по опубликованным данным.

Было обследовано 300 больных (168 женщин и 132 – мужчин) с асептическим некрозом головки бедренной кости. Все обследованные добровольно обратились за специализированной медицинской помощью в клинику по лечению асептического некроза головки бедренной кости (ООО «Медицинский центр ХуанДи»). Средний возраст составил для мужчин – 56,5 ± 0,1 лет, для женщин – 59,1 ± 0,1 лет. Группа обследованных лиц являлась этногенетически однородной и включала русских, проживающих в Европейской части Российской Федерации.

В данную группу вошли пациенты, у которых диагноз АНГБК устанавливали по результатам объективного осмотра, анализа инструментальных и лабораторных исследований, а также анализа анамнестических данных (диспластические изменения суставов, наличие физических перегрузок, стрессов, травм, низкоэнергетических переломов у пациента или у родителей, избыточное потребление алкоголя, курение, проведение терапии глюкокортикоидами, наличие системных заболеваний, болезней крови, неусваиваемость молока; у женщин учитывали продолжительность периода постменопаузы; у мужчин отмечались проблемы, связанные с пониженными уровнями тестостерона).

Исследования проводили методами компьютерной и магниторезонансной томографии, а также рентгенографии в 3-х проекциях тазобедренных суставов: на спине, на животе, с отведением по Лаунштейну. Стадия АНГБК устанавливалась в соответствии с критериями классификаций Ficat и ARCO. Для оценки функциональной состоятельности суставов использовали анкету Harris Hip score. С помощью ультразвуковой денситометрии на аппарате «Sunlight MiniOmni» (BeamMed. LTD, Израиль) оценивали минеральную плотность и качество костной ткани проксимальной фаланги 3-го пальца недоминантной руки и лучевой кости.

На автоматизированной станции King FisherFlex (Thermo Scíentífíc) осуществляли экстракцию геномной ДНК из лейкоцитов венозной крови пациентов. Определение однонуклеотидных полиморфизмов генов VDR и PAI-1 проводили методами ПЦР и пиросеквенирования с использованием амплификатора «Eppendorf MasterCycler Nexus Gradient» (Германия) и  оборудования с программным обеспечением Pyro Mark Q24 QIAGEN (Германия) на базе коммерческой диагностической лаборатории. При постановке ПЦР использовали: полимеразу и буферный раствор производства ООО «Лаборатория Изоген»; аллель-специфические олигонуклеотиды – ЗАО «Евроген». Для сравнения исследованных показателей использовались опубликованные значения, полученные при проведении общепопуляционных исследований русских в Европейской части Российской Федерации [11, 19, 20].

Статистическая обработка полученных данных включала проверку на соответствие  выборок обследованных лиц и контрольной выборок равновесию Харди-Вайнберга, сопоставление частот исследуемых полиморфизмов в основной и контрольной группах. Достоверность различий определялась на основании точного критерия Фишера (F-критерий) и критерия χ² Пирсона с использованием программного пакета WinPepi (http://www.brixtonhealth.com/pepi4windows.html). Ассоциации между заболеванием и генотипом определялись на основе мультипликативной и аддитивной моделей наследования. Расчет коэффициентов соотношения шансов [21] (odds ratio – OR) с 95% доверительным интервалом, (95% CI) проводили при выявлении значимых различий показателей больных АНГБК и популяционного контроля с использованием программы «Калькулятор для расчета статистики в исследованиях случай – контроль» (https://calc.pcr24.ru/index.php).

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Наблюдаемое распределение частот генотипов по исследованным локусам в контрольных выборках и группах больных соответствует теоретически ожидаемому равновесному распределению Харди–Вайнберга (p > 0,05), за исключением двух случаев: rs11568820 (контроль) – P=0,017; rs1544410 – P=0,052. Данное обстоятельство учитывали при проведении статистической обработки.

Ген рецептора витамина D VDR человека локализован на хромосоме 12q12-q14. В гене VDR обнаружено около 30 однонуклеотидных полиморфизмов, которые можно идентифицировать с помощью соответствующих рестрикционных эндонуклеазных ферментов. Наиболее известны из них ApaI (rs7975232), BsmI (rs1544410), FokI (rs2228570), TaqI (rs731236) и Cdx2 (rs11568820) [22, 23]. Полиморфизм A -3731G (Cdx2) (rs 11568820) расположен в 5′-промоторной области гена VDR. У носителей аллеля G (Cdx2) VDR транскрипционная активность гена снижена до 70% от уровня носителей аллеля А. В работах по изучению данного полиморфизма также было отмечено, что наличие мутантного аллеля A обеспечивает устойчивость носителя к потере минеральной плотности костной ткани в условиях сниженного потребления кальция [19, 24]. Полиморфизм BsmI локализован в 3′-регуляторной области, участвует в регуляции стабильности мРНК. Генотип AA ассоциирован с повышенным риском развития остеопороза у женщин в постменопаузе и ответом на антирезорбтивную терапию [25, 26], а также увеличением риска перелома бедра по сравнению с генотипом GG [27].

Анализ полученных данных (табл. 1) показал, что у больных АНГБК частоты носителей генотипов GG, AG и AA полиморфного локуса A-3731G (Cdx2) гена VDR (rs11568820) достоверно отличались от популяционных контроля: 71,0, 26,0, 3,0% и 44,8, 48,8 и 6,4%, соответственно (χ²=35,26; df [0,1,2], 1, P=3,0E-9). При носительстве генотипа G/G локуса A-3731G (Cdx2) гена VDR вероятность формирования АНГБК возрастает в 3 раза (OR=3,02: CI 2,12–4,29). В группе лиц с диагнозом АНГБК процент носителей G аллеля составил 84% и статистически значимо превышал таковое значение контрольной группы (69,2%) (F=0,000041, ξ²=17,01). Носительство аллеля G ассоциируется с повышенной в 2,3 раза вероятностью развития асептического некроза головки бедренной кости (OR=2,34, CI 1,55–3,52).

Статистически значимых различий частот аллелей в полиморфном локусе +283 A>G (BsmI) гена VDR в группе лиц с патологией и контрольной группе не обнаружено (табл. 1). В данном локусе имеет место незначительное нарушение равновесия Харди-Вайнберга (P=0,052). Установлено, что частоты генотипов данного локуса в группе больных АНГБК и лиц из популяционной выборки достоверно отличаются: 51,0, 41,7, 7,3% и 43,3, 38,3, 18,4%, соответственно (χ²  =3,85; df [0,1,2], 1, P=0,05) (табл. 1); риск развития патологии повышен при носительстве генотипа A/A гена VDR (OR=2,36; 95% CI:1,03–5,42).

Таблица 1.

Частоты аллелей и генотипов полиморфных локусов гена VDR у больных АНГБК и здоровых индивидов

Группы и количество индивидов (n)

A-3731G (Cdx2) (rs11568820)

Частоты аллелей, %

Частоты генотипов, %

G

A

F-критерий

GG

AG

AA

χ2;[0,1,2], df=1

Популяционная выборка (250)*

69,2

30,8

0,000041ξ2=17,01

44,8

48,8

6,4

35,26P=3,0E-9

Больные АНГБК (300)

84,0

16,0

71,0

26,0

3,0

Популяционная выборка (96)**

+283 A>G (BsmI) (rs1544410)

G

A

F-критерий

GG

AG

AA

3,85

P=0,05

Больные АНГБК (300)

63,8

36,2

43,3

41,0

15,7

Примечания: *данные взяты из источника [19];** данные взяты из источника [11]

Ген PAI-1 кодирует один из основных ингибиторов фибринолиза – ингибитор активатора плазминогена 1-го типа (PAI-1). Ген PAI-1 расположен в хромосоме 7q21.3-22 человека. [28, 29]. Основной полиморфизм PAI-1 представляет собой одиночную вставку/делецию гуанина (G) в положении 675 в промоторной области PAI-1 и может вызывать изменения скорости транскрипции гена. Этот полиморфизм включает два аллеля, которые содержат четыре или пять последовательных гуаниновых оснований (4G и 5G). Лица, гомозиготные по аллелю 4G (4G/4G), имеют более высокие уровни транскрипции генов и более высокую плазменную концентрацию PAI-1, по сравнению с гомозиготами по аллелю 5G (5G/5G) и поэтому, возможно, имеют повышенный риск внутрисосудистого тромбоза. У гетерозигот (4G/5G) уровни содержания PAI-1 в плазме промежуточные. Аллель 4G обладает более высокой транскрипционной активностью (продуцирует до шести раз больше мРНК), чем 5G, и характеризуется повышенной экспрессией PAI-1. Повышение концентрации PAI-1 в плазме приводит к увеличению тромбозов. Результаты ряда мета-анализов [30, 31] показали, что полиморфизм PAI-1 -675 4G>5G (rs1799889) может быть связан с риском развития АНГБК.

Таблица 2.

Частоты аллелей и генотипов локуса -675 5G>4G гена PAI-1  у больных АНГБК и здоровых индивидов

Группы и количество индивидов (n)

-675 5G>4G (rs1799889)

Частоты аллелей, %

Частоты генотипов, %

5G

4G

χ2;df=15,03P =0,02

5G/5G

5G/4G

4G/4G

χ2;

[0,1,2], df=1

4,64P =0,03

Популяционная выборка (228)*

41,95

58,05

Больные АНГБК (162)

50,0

50,0

Примечания: *данные взяты из источника [10]

Анализ приведенных в таблице 2 данных показал, что носительство аллеля 5G полиморфного локуса PAI-1 -675 4G>5G (rs1799889) у больных АНГБК выявляется чаще, чем у лиц из популяционной выборки: 50,0% против 41,95% (OR=1,39; 95% CI:1,04–1,85). Следует отметить, что генотипические частоты данного полиморфного локуса в популяционной выборке и группе больных АНГБК достоверно отличаются: 51,0, 41,7, 7,3% и 43,3, 38,3, 18,4%, соответственно (χ²  = 4,64; df [0,1,2], 1, P=0,03) (табл. 2); риск развития  патологии повышен в 2 раза при носительстве генотипа 5G/5G в данном локусе гена PAI-1 (OR=1,98; 95% CI:1,22–3,20).

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Анализ полученных в ходе исследования данных показал, что при носительстве генотипа G/G локуса A-3731G (Cdx2) гена VDR вероятность развития АНГБК повышена в 3 раза (OR =3,02: CI 2,12 – 4,29). Доля носителей аллели G среди лиц с данным видом патологии (84%) достоверно превышала показатели контрольной группы (69,2%) (F = 0,000041, ξ² = 17,01). Носительство аллеля G ассоциировано с повышенной в 2,3 раза вероятностью развития асептического некроза головки бедренной кости (OR =2,34, CI 1,55 – 3,52).

Статистически значимых различий частот аллелей в полиморфном локусе +283 A>G (BsmI) гена VDR в группе лиц с патологией и контрольной группе не обнаружено. Однако частоты генотипов данного локуса в группе больных АНГБК и лиц из популяционной выборки достоверно отличаются: 51,0, 41,7, 7,3% и 43,3, 38,3, 18,4%, соответственно (χ² =3,85; df [0,1,2], 1, P=0,05); риск развития  патологии повышен при носительстве генотипа A/A в гене VDR (OR=2,36; 95% CI:1,03–5,42).

Анализ полученных данных показал, что носительство аллеля 5G полиморфного локуса PAI-1 -675 4G>5G (rs1799889) у больных АНГБК выявляется чаще, чем у лиц из популяционной выборки: 50,0% против 41,95% (OR=1,39; 95% CI:1,04–1,85). При этом генотипические частоты данного полиморфного локуса в контрольной выборке и группе больных АНГБК достоверно отличаются: 51,0, 41,7, 7,3% и 43,3, 38,3, 18,4%, соответственно (χ²=4,64; df [0,1,2], 1, P=0,03). Риск развития патологии повышен в 2 раза при носительстве в данном локусе гена PAI-1 генотипа 5G/5G (OR=1,98; 95% CI:1,22–3,20).

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о возможности определения наследственной предрасположенности к развитию АНГБК у пациентов с заболеванием опорно-двигательного аппарата и, следовательно, возможности своевременного проведения профилактики данного заболевания.

ЛИТЕРАТУРА

1. Banerjee S., Kapadia B.H., Jauregui J.J., Cherian J.J., Mont M.A. Natural History of Osteonecrosis. In: Koo KH., Mont M., Jones L. (eds) Osteonecrosis. 2014. Springer, Berlin, Heidelberg. DOI: 10.1007/978-3-642-35767-1_20.
2. Волков Е.Е., Кэцинь Хуан. Асептический некроз головки бедренной кости. Безоперационное лечение. Москва: Пиар-Пресс, 2010. 110 с.
3. Seamon J., Keller T., Saleh J., Cui Q., The Pathogenesis of Nontraumatic Osteonecrosis. Arthritis. 2012. DOI:10.1155/2012/601763.
4. Ilyinykh E.V., Барскова В.Г., Лидов П.И., Насонов Е.Л. Остеонекроз. Часть 1. Факторы риска и патогенез. Современная ревматология. 2013.Т.7. № 1. С.17-24. https://doi.org/10.14412/1996-7012-2013-2362
5. Li Z., Huang C., Yang B., Wei H., Chan M., Wu W.. Emerging roles of long non-coding RNAs in osteonecrosis of the femoral head. American Journal of Translational Research. 2020. No 12. P. 5984-5991.
6. Haydock M.M., Elhamdani S., Alsharedi M. Long-term direct oral anticoagulation in primary osteonecrosis with elevated plasminogen activation inhibitor. SAGE Open Medical Case Reports. 2019.Vol. 7. DOI: 10.1177/2050313X19827747.
7. Orth P., Anagnostakos K. Coagulation abnormalities in osteonecrosis and bone marrow edema syndrome. Orthopedics. 2013. Vol. 36, No 4, P. 290–300.
8. Seamon J, Keller T, Saleh J, Cui Q. The pathogenesis of nontraumatic osteonecrosis. Arthritis. 2012, 601763. DOI: 10.1155/2012/601763.
9. Hadjigeorgiou G., Dardiotis E., Dardioti M., Karantanas A.Dimitroulias A., Malizos K. Genetic association studies in osteonecrosis of the femoral head: mini review of the literature. Skeletal Radiology. 2008.Vol. 37, No 1. P. 1-7. DOI: 10.1007/s00256-007-0395-2.
10. Holick M.F. Vitamin D deficiency. N. Engl. J. Med. 2007. Vol. 357, No P. 266–281. DOI: 10.1056/NEJMra070553.
11. Козлов А.И., Вершубская Г.Г., Негашева М.А.Полиморфизм гена рецептора витамина D (VDR) в выборках населения Европейской России и Приуралья // Пермский медицинский журнал. 2016. № 5. С.60-66. DOI: 17816/pmj33560-66
12. Zeng Z., Wang B., Pan H. Relation between osteonecrosis of the femoral head and PAI-1 4G/5G gene polymorphism: a meta-analysis. Int J Clin Exp Med. 2015. Vol. 8, No 11. 20337–20342.
13. Волков Е.Е., Гордеев М.В., Голощапов А.П., Романова А.Р., Ностаева С.Э. Исследование полиморфных локусов генов CALCR, COL1A1, VDR, LCT у пациентов с асептическим некрозом головки бедренной кости // Журнал клинической и экспериментальной ортопедии им. Г.А. Илизарова «Гений ортопедии». 2018. Т. 24, № 3. С. 335-340. DOI: 10.18019/1028-4427-2018-24-3-335-340.
14. Chen B., Zhu W.F., Mu Y.Y., Liu B., Li H.Z., He X.F. Association between vitamin D receptor BsmI, FokI, and Cdx2 polymorphisms and osteoporosis risk: an updated meta-analysis. Biosci Rep. 2020 Jul 31;Vol., No7:BSR20201200. DOI: 10.1042/BSR20201200. PMID: 32627819; PMCID: PMC7364509.
15. Пизова Н.В. Тромбофилии: генетические полиморфизмы и сосудистые катастрофы. М.: ИМА-ПРЕСС, 2013. – 248 с.
16. Kim H., Cho C., Cho Y., Cho S., Yoon K., Kim K. Significant associations of PAI-1 genetic polymorphisms with osteonecrosis of the femoral head. BMC Musculoskelet Disord. 2011. No 12. 160. DOI:10.1186/1471-2474-12-160.
17. Lu Y.,Yu Q, Guo W., Hao Y., Sun W., Cheng L. Effect of glucocorticoids on the function of microvascular endothelial cells in the human femoral head bone. Advances in Clinical and Experimental Medicine. 2020. Vol. DOI:10.17219/acem/112602.
18. Li Y., Liu F., Yuan C., Meng L.. Association between plasminogen activator inhibitor gene polymorphisms and osteonecrosis of the femoral head susceptibility: A case-control study. Medicine. 2017. Vol. 96. e7047. DOI:1097/MD.0000000000007047.
19. Базилевская Е.М., Якубова И.Ш., Топанова А.А. Оценка генетической предрасположенности молодых жителей г. Санкт-Петербурга к заболеваниям, связанным с нарушением обмена кальция // Клинические и экспериментальные исследования. 2014. Т. 52, № 3. С. 96-99.
20. Шихбабаева Д.И., Полушкина Л.Б., Шуваев В.А., Мартынкевич И.С., Капустин С.И., Замотина Т.Б., Фоминых М.С., Удальева В.Ю., Зотова И.И., Шмелева В.М., Смирнова О.А., Волошин С.В., Бессмельцев С.С., Чечеткин А.В., Абдулкадыров К.М. Генетические маркеры наследственной тромбофилии и риск тромботических осложнений у больных с истинной полицитемией // Клиническая онкогематология. 2017. Т. 10, №1. С. 85-92. DOI: 10.21320/2500-2139-2017-10-1-85-92.
21. Москаленко М.В., Асеев М.В., Котова С.М., Баранов В.С. Анализ ассоциации аллелей генов Col1A1, VDR и CALCR с развитием остеопороза // Экологическая генетика. 2004. Т. II, № 1. С. 38-43.
22. Uitterlinden A.G., Fang Y., Van Meurs J.B., Pols H.A., Van Leeuwen J.P. Genetics and biology of vitamin D receptor polymorphisms. Gene. 2004. Vol. 338, No 2. P 143-156. DOI:10.1016/j.gene.2004.05.014.
23. Пальшина А.М., Пальшина С.Г., Сафонова С.Л., Пальшин В.Г. На заметку клиницисту: современный взгляд на метаболизм витамина Д и полиморфизм гена рецептора витамина Д // Вестник Северо-Восточного федерального университета им. М.К. Аммосова. Серия: Медицинские науки.2018. №3(12). С. 34-42. DOI 10.25587/SVFU.2018.3(13).18855.
24. Arai H., Miyamoto K.I., Yoshida M., Yamamoto H., Taketani Y., Morita K. et al. The polymorphism in the caudal-related homeodomain protein Cdx-2 binding element in the human vitamin D receptor gene. J. Bone Miner. Res. 2001. Vol. 16, No 7. P. 1256–1264. DOI:10.1359/jbmr.2001.16.7.1256.
25. Marozik P.M., Tamulaitiene M., Rudenka E., Alekna V., Mosse I., Rudenka A., Samokhovec V., Kobets K. Association of Vitamin D Receptor Gene Variation With Osteoporosis Risk in Belarusian and Lithuanian Postmenopausal Women. Front Endocrinol (Lausanne). 2018 Jun 5. Vol. 9, Art. 305. DOI: 10.3389/fendo.2018.00305.
26. Zhang L., Yin X., Wang J., Xu D., Wang Y., Yang J., Tao Y., Zhang S., Feng X., Yan C. Associations between VDR Gene Polymorphisms and Osteoporosis Risk and Bone Mineral Density in Postmenopausal Women: A systematic review and Meta-Analysis. Sci Rep. 2018 Jan 17;8(1):981. DOI: 10.1038/s41598-017-18670-7.
27. Horst-Sikorska W. Dytfeld J., Wawrzyniak A., Marcinkowska M., Michalak M., Franek E., Napiórkowska L., Drwęska N., Słomski R. Vitamin D receptor gene polymorphisms, bone mineral density and fractures in postmenopausal women with osteoporosis. Mol. Biol. Rep.Vol. 40. P. 383-390.DOI:10.1007/s11033-012-2072-3.
28. Klinger K.W., Winqvist R., Riccio A., Andreasen P.A., Sartorio R., Nielsen L.S., Stuart N., Stanislovitis P., Watkins P., Douglas R., Grzeschik K-H., Alitalo K., Blasi F., Dano K. Plasminogen activator inhibitor type 1 gene is located at region q21.3-q22 of chromosome 7 and genetically linked with cystic fibrosis. Proc Natl Acad Sci USA. 1987. Vol. 84. P. 8548-8552
29. Трифонова Е.А., Габидулина Т.В., Бухарина И.Ю., Степанов В.А. Роль факторов наследственной предрасположенности в развитии преэклампсии: обзор данных мета-анализов // Молекулярная медицина. Т. 14, № 1. С: 8-14.
30. Sobhan M., Mahdinezhad-Y.M. , Moghimi M., Aghili K., Jafari M., Zare-Shehneh M., Neamatzadeh H. Plasminogen activator inhibitor-1 4G/5G polymorphism contributes to osteonecrosis of the femoral head susceptibility: Evidence from a Systematic Review and Meta-analysis. Archives of Bone and Joint Surgery. 2018.Vol.6, No 6. P. 468-477. DOI:10.22038/ABJS.2018.31668.1828.
31. Yang J., Jing M., Yang X. Association between genetic polymorphisms and osteonecrosis in steroid treatment populations: a detailed stratified and dose-response meta-analysis. Biosci Rep. 2019. Vol. 39. No 5. DOI: 10.1042/BSR20190024.